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z6尊龙请回答为您讲解“脱靶风险的研究流程”。
关于脱靶风险的研究流程可以分为以下几个步骤：
首先需要查数据库，确认mRNA上siRNA结合位点的保守性，最好所有种族人群都是100%保守。
然后可以利用生物信息学，基于序列同源性筛查人类转录组。除了靶mRNA之外，还有没有其他mRNA能够和siRNA或其反义链结合，尤其需要注意有没有管家基因能够结合。
接下来可以在体外，比如用Hep3b细胞采用定量PCR方法确认siRNA是否会影响其他mRNA的表达水平,需要注意所选用的细胞可能不能全部表达所有可疑mRNA。
最后可以在后续非临床药效学和毒性研究中看哪些异常是脱靶效应。
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